日期:2013-06-28 来源:本站 供稿: 作者:管理员 类别:摘录转发
传统的酶电极基于纯酶在电极上的固定,存在酶固定效率低、渗漏、易失活和成本高等不足,是发展酶基生物传感器和生物燃料电池的瓶颈问题。与传统的酶制备方法相比,微生物表面展示技术通过直接利用表面展示有重组蛋白的全细胞作为催化剂进行酶促反应,具有纯化步骤简单,酶蛋白活性高、稳定性好等优点。
近日,中国科学院青岛生物能源与过程研究所的科研人员在葡萄糖氧化酶(GOX)酵母表面展示体系的构建及开发新型葡萄糖电化学生物传感器方面取得新进展。GOX是一种来源于真核生物的糖蛋白,广泛用于食品防腐和保鲜,医药工业上生产葡萄糖酸,然后进一步生产葡萄糖酸钾、钙、锌等微量元素保健品,以及制备血糖试纸和葡萄糖氧化酶生物传感器。科研人员利用a凝集素作为锚定蛋白将GOX展示在酿酒酵母细胞的表面,综合运用免疫化学分析以及酶活测定的方法证实了融合蛋白高效地表达并固定在细胞表面。与胞外分泌表达的GOX相比,细胞表面展示的GOX具有更好的热稳定性、pH稳定性和底物特异性,特别是酵母细胞不影响重组蛋白GOX的直接电化学。基于GOX展示的酵母全细胞和多壁碳纳米管构筑生物电极,制成了新型葡萄糖生物传感器,实现了葡萄糖的检测。该传感器具有灵敏度高、特异性好、重复性好、稳定性高、测量简便、成本低和可用于实际样品的检测等优点。
GOX酵母展示系统也可用于研发其他氧化酶(如酒精氧化酶、乳酸氧化酶、谷氨酸氧化酶等)展示的酵母全细胞催化剂,可望广泛应用于生物传感、生物能源和生物工业催化等领域。
来源:中国科学院
供稿:工业生物技术处