日期:2020-12-11 来源:本站 供稿:工业生物技术处 作者:管理员 类别:独立撰写
当前用于食品安全快速检测的生物识别材料主要是基于传统的细胞融合和噬菌体展示制备,存在融合效率低、性能不可控、天然轻重链不匹配等问题,难以筛选到高亲和力、高特异性和高稳定性的单克隆抗体用于复杂食品基质的快速检测。在国家重点研发计划“食品安全关键技术研发”重点专项支持下,中国农业大学研究团队针对此问题开展了小分子化合物单克隆抗体精准制备和进化技术研发,建立了一套从靶标特异性B细胞精准分选、杂交瘤细胞精准识别及抗体性能体外进化的技术体系。
研究依托流式细胞技术和自主开发的单细胞微流控芯片,实现了单个靶标特异性B细胞的精准分选,通过高通量测序/单细胞测序获取抗体序列,应用真核/原核表达技术实现了鼠源、兔源和驼源高质量单克隆抗体的精准制备,同时采用分子模拟、生物物理学等技术手段阐明了抗体识别机制,确定了抗体结合的关键氨基酸和关键作用力,采用热点突变、限制性突变和CDR移植等抗体合理设计技术,实现了抗体性能的可控进化,使其适用于食品基质复杂样本,大幅提升了检测性能,为下一代快速检测技术及产品开发提供了核心材料。
相关研究成果已申请国家发明专利6项。应用单克隆抗体精准制备和进化技术制备出的洛美沙星、氟苯尼考、氯霉素等小分子化合物的抗体材料已用于快速检测试剂盒和检测卡的开发,这些产品已在全国食品生产企业和各级食品监测机构得到了应用,产生了良好的经济效益和社会效益。